Descripción
La resina de acoplamiento de carbohidratos (resina de hidrazida) está diseñada para el acoplamiento simple y eficiente de glicoproteínas a un soporte sólido de agarosa a través de grupos de azúcar oxidados. El acoplamiento se realiza a través del grupo hidrazida que se inmoviliza a las perlas de agarosa. La resina es ideal para anticuerpos policlonales inmovilizados, ya que estos son abundantes en carbohidratos en su dominio Fc. La ubicación en el dominio Fc asegura que el sitio de unión del anticuerpo esté orientado lejos de la resina para una unión óptima y un obstáculo estérico reducido.
Los componentes del azúcar glicoproteico se oxidan primero con metaperiodato de sodio para convertir los grupos cisglicol en aldehídos reactivos. Estos aldehídos reaccionan espontáneamente con el grupo hidrazida de la resina de acoplamiento de carbohidratos, formando enlaces estables de hidrazona (ver figura). El brazo espaciador largo (23Å) reduce el obstáculo estérico y asegura una mayor unión de proteínas y anticuerpos durante la purificación por afinidad. La resina de afinidad generada se puede reutilizar al menos 10 veces sin pérdida significativa de actividad.
El kit de inmovilización de carbohidratos se suministra con columnas de resina de acoplamiento de carbohidratos para la preparación de columnas de afinidad de 2 ml, Un catalizador de acoplamiento, Columnas desalinizadoras SpinOUT™ GT-600 para eliminar los reactivos oxidantes, el reactivo oxidante (metaperiodato de sodio) y los tampones relevantes.
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Funciones
Resina activada por hidrazida para la unión de aldehídos reactivos
Pareja 1-5 mg de glicoproteína/ml de resina
Brazo espaciador largo (23Å)
Condiciones de acoplamiento suaves
Aplicaciones
Inmovilizar glicoproteínas
Inmovilizar los anticuerpos policlonales a través de su dominio Fc para una orientación óptima
Inmovilizar cualquier molécula con azúcares oxidados
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