Descripción
Una tripsina químicamente modificada, tratada con TPCK y purificada por afinidad. La tripsina de grado de espectrometría de masas de G-Biosciences se metila químicamente para producir una proteína enzimáticamente activa con la máxima especificidad de tripsina y una resistencia extrema a la autólisis. Además, la tripsina modificada se trata con TPCK para inactivar la actividad de quimotripsina que interfiere, y la proteína resultante se purifica por afinidad y liofiliza para producir nuestra tripsina de grado de espectrometría de masas. La tripsina resultante tiene una actividad específica superior a las 10.000 unidades por miligramo de proteína. La actividad máxima está en el rango de pH de 7 a 9 y la actividad se inactiva reversiblemente a un pH de 4.
La tripsina es una serina endopeptidasa que escinde específicamente los enlaces peptídicos en el lado carboxilo de los residuos de s-aminoetil cisteína, arginina y lisina y, por lo general, hay poca o ninguna escisión en los enlaces arginil-prolina y lisil-prolina. La distribución de estos residuos en las proteínas permite que la digestión de la tripsina produzca péptidos que se identifican fácilmente mediante espectrometría de masas. La tripsina nativa es propensa a la autólisis que da lugar a pseudotripsina, que exhibe una especificidad proteolítica más amplia (una actividad similar a la quimotripsina) y fragmentos de tripsina que interfieren con el análisis de secuencias.
A diferencia de otras preparaciones de tripsina, nuestra tripsina de grado de espectrometría de masas es altamente estable. Como resultado, se puede almacenar durante un largo período de tiempo sin pérdida de actividad (ver figura anterior)).
Suministramos dos fuentes de tripsina de grado de espectrometría de masas, ya sea bovina o porcina. Para el análisis de secuencias por espectrometría de masas, se recomienda una proporción de tripsina a proteína que oscile entre 1:20 y 1:100. Para mayor comodidad, nuestra tripsina de grado de espectrometría de masas porcina se suministra liofilizada en viales de 20, 100 o 200 μg con un tampón de resuspensión específico. Nuestra tripsina de grado de espectrometría de masas bovina se suministra liofilizada en viales de 20 μg con un tampón de resuspensión específico.
Funciones
Tripsina de grado de especificación de masa
Tripsina porcina o bovina ultrapura (A tripsina humana recombinante también se ofrece)
Modificado por metilación y tratamiento TPCK
Resistente a la autólisis y a la degradación
Estable a temperatura ambiente y adecuado para el almacenamiento a largo plazo
Actividad específica: >10.000U/mg de proteína
Aplicaciones
Digestión de proteínas para el análisis de secuencias y fragmentos peptídicos
Adecuado para aplicaciones de secuenciación y espectrometría de masas
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