Descripción
La proteinasa K (también proteasa K, endopeptidasa K, peptidasa K o fosfatasa alcalina Tritirachium) (EC 3.4.21.64) es una serina proteasa no específica de amplio espectro que se aísla del hongo saprófito Tritirachium album.
La proteinasa K se utiliza de forma rutinaria para la purificación del material diana de proteínas contaminantes, para el aislamiento de ARN y ADN y para inactivar otras actividades enzimáticas de proteínas. La proteinasa K exhibe una alta actividad en presencia de SDS, urea y EDTA. Esto permite el uso de EDTA en la purificación de ADN o ARN para inhibir nucleasas dependientes de calcio.
Proteinasa K, liofilizada
El polvo seco liofilizado es altamente soluble (>50 mg/ml); Sin embargo, las soluciones madre suelen ser de 20 mg/ml. La proteinasa K está completamente libre de ARNasa y DNasa y tiene una actividad específica de >30 unidades/mg a 37°C. El tampón de almacenamiento recomendado es 20 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 1 mM de CaCl2, 50% de glicerol. La proteinasa K es estable durante 1 año en este tampón de almacenamiento, el almacenamiento recomendado es de -20 °C.
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