Descripción
El ensayo fluorescente de β-galactosidasa (MUG) es un ensayo fluorescente de alta sensibilidad para determinar la actividad de la β-galactosidasa en los lisados de células transfectadas con una construcción de expresión de β-galactosidasa
El estudio del operón lac ha jugado un papel importante en la comprensión del control de la expresión génica en bacterias. En los procariotas, la expresión génica se controla principalmente a nivel de transcripción. En el caso de los eucariotas, la actividad del promotor puede analizarse mediante el uso de genes de fusión que contienen el promotor de interés unido al gen bacteriano de la β-galactosidasa y analizarse midiendo la actividad de la β-galactosidasa. Debido a que la β-galactosidasa tiene una alta tasa de recambio y está ausente en las células de mamíferos, sirve como una herramienta de notificación muy útil y sensible para la expresión génica.
Los ésteres del compuesto fluorescente, 4-metilumbeliferona (4-MU), proporcionan un ensayo cuantitativo sensible para la β-galactosidasa. La 4-metilumbeliferol-β-D-galactopiranósido (4-MUG) es un sustrato de la β-galactosidasa que no emite fluorescencia hasta que la enzima la escinde para generar el fluoróforo 4-metilumbeliferona. El ensayo se puede utilizar con extractos de diferentes sistemas de expresión, incluidos mamíferos, células de insectos, levaduras y bacterias.
El ensayo fluorescente de β-galactosidasa (MUG) proporciona un formato de ensayo de 96 pocillos para la actividad de la galactosidasa que es adecuado para aplicaciones de alto rendimiento. La producción del fluorforo se controla a una longitud de onda de emisión/excitación de 365/460 nm. Este kit está diseñado para 500 ensayos de micropocillos.
Funciones
Ensayo de β-galactosidasa fluorescente Sensitve
Utiliza fluoróforo 4-metilumbeliferol-β-D-galactopiranósido (4-MUG)
Se suministra con 4-metilumbeliferona (4-MU) para calibración y patrones
500 microensayos
Aplicaciones
Para la detección de niveles de transfección en células
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