Descripción
La ADN polimerasa de Pfu, derivada de las arqueas hipertermófilas Pyrococcus furiosus, tiene propiedades superiores de termoestabilidad y corrección en comparación con otras polimerasas termoestables. Su peso molecular es de 90 kD. Puede amplificar el objetivo de ADN hasta 2kb. La velocidad de elongación es de 0,2 ~ 0,4 kb / min (70 ~ 75 °C). La ADN polimerasa de Pfu posee una actividad de corrección de exonucleasas de 3» a 5» que permite a la polimerasa corregir errores de incorporación incorrecta de nucleótidos. Esto significa que los fragmentos de PCR generados por ADN polimerasa de Pfu tendrán menos errores que los insertos de PCR generados por Taq. El uso de la ADN polimerasa de Pfu en sus reacciones de PCR da como resultado productos de PCR de extremo romo, que son ideales para clonar en vectores de extremo romo. La ADN polimerasa de Pfu es superior para técnicas que requieren síntesis de ADN de alta fidelidad
BÚFER DE
ALMACENAMIENTO 20 mM Tris.HCl (pH8.0), 100 mM KCl, 3 mM MgCl2, TDT de 1 mM, Nonidet P-40 al 0,1 %, Tween®® 20 al 0,1 %, BSA de 0,2 mg/ml, glicerol al 50 % (v/v).
10X Pfu BUFFER
200mM Tris-HCl (pH8.8), 100mM KCl, 100mM (NH4)2Así que4, 20mM MgSO4, Triton® X-100 al 1% y BSA a 1 mg/ml.
unidad (U) de enzima se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la incorporación de 10 nanomoles de desoxirribonucleótidos en material insoluble en ácido en 30 minutos a 70 °C utilizando ADN de espermatozoides de arenque como sustrato.
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