Descripción
La ADN polimerasa Taq es una ADN polimerasa recombinante altamente termoestable derivada del termófilo Thermus aquaticus. El peso molecular de la proteína recombinante es de 94kD. La polimerasa Taq es capaz de amplificar el ADN hasta 5 kb con una velocidad de elongación de 0,9-1,2 kb/min a 70-75 °C. La tasa de error de esta polimerasa Taq es de ~2,2×10-5 ciclo de nucleótido-1-1. La ADN polimerasa Taq cataliza la síntesis 5»→3» del ADN. La enzima no tiene actividad exonucleasa de corrección 3»→5» detectable y posee una baja actividad exonucleasa 5»→3», lo que da como resultado un exceso de 3»-dA en el producto
de PCR FUENTE
Proteína recombinante expresada en E. coli que porta el gen pol para Thermus aquaticus.
BÚFER DE ALMACENAMIENTO
20 mM de Tris.HCl (pH8.0), 100 mM de KCl, 3 mM de MgCl2, 1mMDTT, 0,1% Nonidet® P-40, 0,1% Tween® 20, 0,2 mg/ml BSA, 50% (v/v) glicerol.
TAMPÓN DE PCR 100 mM Tris-HCL pH8.8, KCl de 500 mM, MgCl de 16 mM2, 1% TritonX-100
Una unidad (U) de polimerasa Taq se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la incorporación de 10 nanomoles de desoxirribonucleótidos en material insoluble en ácido en 30 minutos a 70 °C utilizando ADN de espermatozoides de arenque como sustrato.
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